蔗糖梯度離心是一種密度梯度離心,其中通過(guò)改變蔗糖的濃度由蔗糖形成密度梯度。
蔗糖梯度離心原理
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蔗糖梯度離心基于以下原理:分子在離心力作用下沉降,直到它們到達(dá)密度與其密度相同的介質(zhì)。
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在這種情況下,使用具有蔗糖梯度的介質(zhì),其頂部的密度較低,而底部的密度較高。
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當(dāng)樣品旋轉(zhuǎn)時(shí),樣品中的分子會(huì)穿過(guò)介質(zhì),從而產(chǎn)生離心力。
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當(dāng)密度更高的分子通過(guò)密度梯度時(shí),它們開始向底部移動(dòng)。
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然后,分子在顆粒密度等于周圍介質(zhì)的點(diǎn)處懸浮。
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以這種方式,具有不同密度的分子在不同的層上分離,然后可以通過(guò)各種方法進(jìn)行回收。
蔗糖梯度離心的步驟
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蔗糖的密度梯度是通過(guò)將較低濃度的蔗糖輕輕放置在離心管中的較高濃度上而產(chǎn)生的。
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然后將樣品放置在梯度上方,并將試管放置在超速離心機(jī)中。
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粒子穿過(guò)梯度,直到達(dá)到其密度與周圍介質(zhì)的密度匹配的點(diǎn)。
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除去和分離級(jí)分,獲得作為分離單元的顆粒。
蔗糖梯度離心的用途
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蔗糖梯度離心是一種強(qiáng)大的技術(shù),可用于分離大分子,如DNA和RNA。
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這也已用于蛋白質(zhì)復(fù)合物的分析,并確定各種其他大分子的密度和大小。